Marknaden för terapeutiska proteiner kan grovt delas in i 2 områden: de
proteiner som inte modifieras efter translationen och de som kräver
posttranslationell modifiering (bl a glykosylering) för att vara biologiskt
aktiva. Eprex®: humant rekombinant erytropoietin är ett glykoprotein som
används vid anemi, det stimulerar mitos och differentiering av stamceller i
benmärgen till mogna erytrocyter. Erytropoietin är bara ett av många
läkemedel för humant bruk som tillverkas i mammalieceller. Mammalieceller
är de som är lämpligast att använda som uttryckssystem för terapeutiska
glykoproteiner tänkta för humant bruk. Detta eftersom de innehåller de
organeller och enzym som krävs för att erhålla korrekt proteinkonformation
och utföra avancerade posttranslationella modifikationer.
Jäst, insektsceller och andra lägre eukaryota organismer glykosylerar sina
proteiner, men inte på ett humanlikt sätt. Bakterien Escherichia coli
(E.coli) är ett vanligt uttryckssystem då glykosylering av proteinet inte är
nödvändigt för funktionen, som exempel kan nämnas insulinet Humulin®. Man
har länge trott att bakterier inte kan glykosylera proteiner, men nyligare
bevis tyder på motsatsen. Uttryckssystem såsom mammalieceller, jäst,
insekter, växter och bakterier har alla sina styrkor men även svagheter när
det gäller produktion av terapeutiska glykoproteiner för humant bruk. Försök
har gjorts att humanisera den nödvändiga glykosyleringen i de olika
uttryckssystemen.
Syftet med denna studie har varit att ta reda på vad terapeutiska
glykoproteiner är, vilka funktioner de har samt hur de kan tillverkas i
olika uttryckssystem.
Litteratur söktes i olika databaser över vetenskapliga artiklar. I den
laborativa delen producerades glykoproteinet PSGL1-mIgG2b med jästen Pichia
Pastoris i bioreaktor. Analyser av produktivitet och kvalitet av
glykoproteinet utfördes med ELISA och western blot. Denna laboration
dokumenterades i en separat rapport med format enligt vetenskapliga
rapporter. En översikt över denna laboration ingår även i denna rapport.
...
