Enzymatisk modifiering av fiskolja - jämförelse mellan olika lipaser.
I detta arbete studerades tre olika lipaser som katalyserade en metanolysreaktion i fiskolja.
Målet med arbetet var att finna ett specifikt lipas för produktion av en EPA/DHA fraktioner från fiskoljan i en metanolysreaktion få högt utbyte av Sn-2 monoglycerider av EPA och/eller DHA och med detta kunna möjliggöra uppkoncentrering av hälsoviktiga fettsyror jämföra reaktionen i normal och superkritisk atmosfär.
Metanolysen ägde rum i normal och superkritisk atmosfär genom att oljan, enzymet och metanol blandades i respektive reaktorn.
Sn-1,3 specifika lipaser var isolerade från Thermomyces lanuginosa (Lipozym TL IM från Novozymes, Danmark) och Rhizomucor miehei (Lypozym RM IM från Novozymes, Danmark ) och ospecifik lipas från Pseudamonas sp.(Amano-C från Amano Enzyme Inc. Japan). Alla enzymer var immobiliserade på jonbytare.
I försöken användes ?Ledins? fiskolja som var köpt i en lokal affär. Oljan var en blandning extraherad från oceanernas olika fiskklasser. Den innehöll även antioxidanter i form av vitamin E och naturlig citronolja.
Reaktionsprodukter analyserades med TLC. Mängd EPA respektive DHA bestämdes med GC.
Studier i normal atmosfär visar att Amano C är mer specifikt för omega-3 fettsyror än de andra undersökta enzymerna. Redan efter 5,5 tim reaktionstid blev utbyte i form av EPA MG 67 % och DHA MG 82 %. Efter 22h reaktionstid blev utbyte av EPA MG 94 % och DHA MG 100 %. Studier i superkritisk atmosfär visar lägre aktivitet av enzymet Amano C jämfört med normal atmosfär.
Enzymet TL IM visade lägst specificitet i normal atmosfär. Högsta utbytet beräknad för EPA MG till 2 % respektive för DHA MG till 5 %. I superkritisk atmosfär konstaterades maximalt utbytet efter reaktionstid på 4 tim. Utbyte för EPA MG blev 29 % och för DHA MG 100 %. Det innebär att enzymet är mycket specifik för DHA produktion.
I reaktioner med enzymet RM IM blev utbytet för EPA/DHA relativt konstant jämfört med andra enzymer. I normal atmosfär efter 22 tim blev utbyte av EPA MG 60 % och DHA MG 63 %.
I superkritisk atmosfär efter 22 tim blev utbyte av EPA MG 30 % och av DHA 60 %.
Av ovanstående ...
